همسانهسازی ژن شبه انسولین انسانی در ناقلهای بیانی گیاهی
سرگل دارابی، سونیا رمضانی، محمد احمدآبادی / مجله بیوتکنولوژی کشاورزی، دوره 9، شماره 1، تابستان 1396
مجله بیوتکنولوژی کشاورزی، دوره 9، شماره 1، تابستان 1396، صفحه 15-30 اصل مقاله (602 K) | |
نوع مقاله: مقاله پژوهشی | |
شناسه دیجیتال (DOI): 10.22103/jab.2017.1666 | |
نویسندگان | |
سرگل دارابی1؛ سونیا رمضانی1؛ محمد احمدآبادی 2 | |
1دانشجوی کارشناسی ارشد، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان | |
2استادیار، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
تاریخ دریافت: 29/07/1392، تاریخ پذیرش: 25/07/1394 |
|
چکیده | |
گیاهان تراریخت، بیورآکتورهای مناسبی برای تولید پروتئینهای نوترکیب در سطوح بالا و با کیفیت بهتر میباشند. همسانه سازی ژن کدکننده پروتئین هدف در ناقل بیانی مناسب یکی از مراحل مهم در انتقال و بیان موفق پروتئین در گیاه مورد نظر میباشد. هدف از این تحقیق، همسانه سازی cDNA فاکتور رشد شبه انسولین-1 (IGF1) در ناقلهای بیانی مناسب گیاهی بود. برای این منظور، ابتدا با استفاده از یک جفت آغازگر اختصاصی، cDNAی ژن IGF1 تکثیر و با استفاده از سایتهای برشی تعبیه شده در ساختار آغازگر در ناقل پایه pMCS5 وارد گردید. با توجه به مزایای غلات بدلیل کشت وسیع، بیوماس بالا، قابلیت ذخیره دانه و قابلیت استفاده خوراکی برای تولید پروتئینهای دارویی، پس از توالییابی، cDNA در یک ناقل مناسب برای انتقال و بیان پروتئین در غلات همسانه سازی گردید. همچنین با توجه به اینکه کلروپلاستهای تراریخته پتانسیل بیشتری برای تولید پروتئین نوترکیب عملکردی در سطوح بالا دارند، cDNAی توالییابی شده در دو ناقل اختصاصی برای انتقال و بیان IGF1 در کلروپلاست توتون نیز همسانه سازی گردید. در یکی از این ناقلها، ژن گزینشگر بوسیله دو توالی مستقیم LoxP احاطه شده تا امکان حذف ژن انتخابگر از طریق سیستم Cre/Lox پس از گزینش گیاهان تراریخت فراهم گردد.
|
|
کلیدواژه ها | |
فاکتور رشد شبه انسولین-1؛ همسانهسازی؛ انتقال ژن؛ پروتئین نوترکیب؛ ناقل بیانی |
[…] همسانهسازی ژن شبه انسولین انسانی در ناقلهای بیانی گ… […]